肌酸在运动前30分钟或运动后立即补充效果较好。肌酸补充时间主要与运动阶段、身体代谢需求、吸收效率、训练目标、个体差异等因素相关。
运动前30分钟补充肌酸有助于提升肌肉磷酸肌酸储备，为高强度训练提供能量支持，尤其适合力量训练或爆发性运动。此时补充可促进肌酸在肌肉组织中的饱和，减少运动中的疲劳感。运动后补充则能快速补充消耗的肌酸储备，配合碳水化合物摄入可加速肌酸吸收，促进肌肉恢复和合成。这个时间段内肌肉血流充沛，对营养物质的吸收利用率较高。
部分研究支持在非训练日分次补充肌酸以维持体内浓度稳定，每日固定时间服用有助于保持肌肉中的肌酸饱和状态。对于耐力型运动员，训练中少量多次补充可能更有利于持续供能。胃肠敏感者应避免空腹服用，可随餐减少不适感。
持续补充肌酸需配合足量饮水以促进吸收利用，建议每日饮水量不少于2000毫升。长期使用者可采用周期性补充策略，普通健身人群每日3-5克即可满足需求。使用肌酸期间应保持规律训练和均衡饮食，避免与咖啡因同服可能影响效果。初次使用者建议从较低剂量开始适应，肾功能异常者需谨慎使用。
